[摘要]
采用荧光素染色法和 acas570 型粘附细胞仪观察冬虫夏草水提液对正常心肌细胞内 ca2 的作用及对缺氧再给氧时细胞内 ca2 的影响。结果显示:冬虫夏草水提液能降低正常心肌细胞内ca2 的浓度,减轻缺氧再给氧时细胞内ca2 超载现象,二者均呈良好的量效关系。提示冬虫夏草水提液可能有减轻缺氧再给氧损伤的作用。
[讨论]
以往测定细胞内ca2 的方法有ca2 激活的发光蛋白、ca2 选择微电极、金属铬指示剂法,但不足以反映各种细胞的快速变化。1980 年由 tsien 等发展起来的荧光染色法为解决细胞内ca2 的测定提供了一种更为有效的方法。acas570 是在荧光染色法的基础上发展起来的,既可作为动态观察,又可大致反映细胞形态。本实验所用的荧光探针 fluo-3 是 ca2 鳌合剂 egta 的衍生物,对 ca 有较高的特异性亲合力,luo-3 本身不能透过细胞膜,将其接一个酯性基团(am)后才能导入细胞中,经细胞内的非特异性的酯酶水解该酯链,释放出 fluo-3,与胞浆ca2 结合后可被一定波长的紫外光激发产生荧光,其荧光强度与 ca 浓度成正比,据此可测定心肌细胞内ca2 的浓度及其变化。
近数年来,动物实验已证实,cs 有扩张冠状动脉、缩小心肌梗塞面积、减轻缺血心肌局部节段运动障碍、降低心律失常发生率的作用。临床上应用cs治疗各类冠心病及心律失常,均有明显效果。我们从细胞水平探讨cs的可能作用机制,结果表明 cs 不但降低正常心肌细胞内ca2 的浓度,对 a/r 引起的钙超载也有明显减轻作用。心肌细胞缺氧再给氧时,细胞内ca2 浓度增加,其浓度与细胞受损程度呈正相关。本实验为应用cs减轻缺氧再给氧损伤提供实验资料和参考。