作者：曹曦明亮李静黄茸茸丁婷
来源：安徽医科大学学报
摘要：目的研究冬虫夏草发酵液的镇静催眠作用。方法采用自发活动仪记录法、小鼠走动时间和举双肢法、戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠法、爬杆实验观察受试药的镇静催眠作用。结果冬虫夏草发酵液可抑制小鼠的自发活动；缩短小鼠入睡潜伏期，延长小鼠睡眠持续时间；提高小鼠爬杆行为级别。结论冬虫夏草发酵液具有一定的镇静催眠作用。
冬虫夏草发酵液(fermentative broth ofcordycepssisnensis，fbcs)为冬虫夏草的无性型发酵产品中的发酵液，临床试用发现其能改善患者的睡眠状态。此研究观察了冬虫夏草发酵液对小鼠的镇静催眠作用，为其提供临床前药效学资料及提供临床实验的治疗学基础。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物昆明种小鼠，雌雄各半，体重18~22g，购自安徽医科大学实验动物中心，普通级。
1.1.2 药品冬虫夏草发酵液冻干粉，由安徽农业大学虫生真菌研究所提供，批号：031224，实验时用蒸馏水配成所需浓度；安神补脑液，吉林敖东延边药业股份有限公司生产，批号031118；戊巴比妥钠，佛山市化工实验厂，批号990901。
1.1.3 仪器 zil-2小鼠自发活动程序控制仪，中国医学科学院药物研究所产品。
1.2 方法
1.2.1 实验分组和给药方法实验动物随机分为5组：对照组、阳性药组(安神补脑液5 ml/kg)、冬虫夏草发酵液三个剂量组(0.6、1.2、2.4 g/kg)。ig给药，连续5 d，末次给药后1h进行实验。
1.2.2 小鼠自发活动实验
1.2.2.1 自发活动仪记录法末次给药后1h，将小鼠投入箱中适应5 min后，记录5 min的自发活动次数。
1.2.2.2 小鼠走动时间和举双肢法末次给药后1h，将小鼠投入底部垫有木屑的箱中适应5 min后，记录2 min内小鼠走动时间及双前肢向上抬举次数。
1.2.3 戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠实验次给药后1h小鼠腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)，以翻正反射消失为入睡时间，从翻正反射消失至恢复时间为睡眠持续时间。
1.2.4 小鼠爬杆实验末次给药后1 h进行实验，取表面粗糙的金属杆， 1.0 cm，长60 cm，垂直竖立并固定。将小鼠置于杆顶端，头朝下，任其自然向下爬行，以观察其协调运动能力。
评级标准如下：0级：一步一步向下爬；0.5级：一步一步向下爬行，向下滑行或跳下<20 cm；1级：向下滑行；1.5级：向下滑行，不能抓住金属杆<20cm；2级：不能抓住金属杆；3级：翻正反射消失。
1.2.5 统计方法计量资料多组间采用方差分析，两组间采用t检验，等级资料采用秩和检验。
2 结果
2.1 冬虫夏草发酵液对小鼠自发活动的影响
2.1.1 自发活动仪记录法表1结果表明，冬虫夏草发酵液(0.6、1.2、2.4 g/kg)可减少小鼠自发活动次数。
2.1.2 小鼠走动时间和举双肢法表2结果表明，冬虫夏草发酵液(0.6、1.2、2.4 g/kg)可减少小鼠走动时间，冬虫夏草发酵液(1.2、2.4 g/kg)使前肢向上抬举次数减少，提示受试药对小鼠的自发活动有一定的抑制作用。
2.2 冬虫夏草发酵液对戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠时间的影响表3结果表明，冬虫夏草发酵液(1.2、2.4 g/kg)可明显缩短小鼠入睡时间，延长睡眠持续时间。
2.3 冬虫夏草发酵液对小鼠爬杆行为的影响表4结果表明，冬虫夏草发酵液(0.6、1.2、2.4 g/kg)可影响小鼠的爬杆行为，表现为爬杆级别的提高，提示受试药对中枢有一定的抑制作用。
3 讨论
中草药是我国的传统瑰宝，具有疗效好、毒副作用少的优点。虫草剂有镇静、催眠作用，作为冬虫夏草无性型发酵液又具有多种与虫草剂相似的药理作用，从而为本药具有镇静催眠作用提供了一定的药理学理论基础。另外，目前国内外对冬虫夏草发酵液的研究较少，各种虫草发酵液常被废弃。因此，冬虫夏草无性型发酵液是一个具有极大开发价值的资源。本研究结果表明，冬虫夏草发酵液能抑制小鼠的自发活动；缩短小鼠入睡潜伏期，延长小鼠睡眠持续时间；提高小鼠爬杆行为的级别。实验结果提示冬虫夏草发酵液具有一定的镇静、催眠作用，为其临床用于治疗失眠焦虑症提供了动物实验基础。冬虫夏草发酵液镇静催眠作用的机制有待进一步研究。
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